上海恒远生物科技有限公司
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一、“大鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒”简介
【检测方法】：酶联免疫法/酶免法(ELISA)
【产品性状】：96T/48T，盒装液体(两种统一规格)
【贮藏条件】：2-8°C
【有 效 期】：二年，我公司Elisa试剂盒均为X新批次，可放心购买。
【主要成分】：酶标板,试剂,标准品等。
【种 属】马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
【产品单价】（具体折扣来电咨询），可免费代测，含税含运费。
【标 本】血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等
注：标本必须为液体，不含沉淀。
二、标本要求
1. 血清：：温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
2. 血浆：根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
3. 尿液：无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4)，或组织蛋白萃取试剂，用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
三、实验原理：
结合在固相载体表面的抗原或抗体与受检标本（抗原或抗体）起反应。用洗涤的方法洗去未结合的抗原或抗体。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，根据呈色的深浅进行定性或定量分析。根据实际的应用方法，可以分成以下几种：
双抗夹心 ELISA：将捕获抗体包被在固相载体上，封闭后加入待检抗原，温育后加入酶标检测抗体，捕获抗体和检测抗体可以是针对不同表位的两种单抗，也可以是针对同一抗原的一种单抗与一种多抗，但是检测抗体需要经过酶标。
竞争ELISA：用待检抗原或抗体去干扰已经预先设计好的体系，X终显色的结果与待检抗原或抗体的干扰程度成负相关。主要应用于只有一个抗原表位的蛋白检测。
多因子ELISA检测技术：多重ELISA芯片技术通过在96孔板的每个孔中以阵列的形式植入1~25种捕获抗体，随后像ELISA一样操作，通过化学发光(HRP酶)和荧光燃料(红外)来检测。
受刺激的细胞产生的细胞因子是短暂的，并且不同细胞因子基因表达的动力学是变化的。通过ELISA实验只能检测到的免疫反应性的细胞因子蛋白的含量，而这并不能完全代表细胞因子的生物活性的水平。例如，使用抗细胞因子抗体的一种ELISA不能区别如TGF-β1的细胞因子蛋白是无活性的前体形式还是有活性的成熟蛋白。此外，一种ELISA可以检测部分降解的细胞因子蛋白，它们仍有免疫反应性（例如至少可识别两个表位），当时它可能却丧失了它们的生物学活性。
四、“大鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒”技术流程
双抗体夹心法(检测未知抗原)
1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做X孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。
4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以X对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
间接法(检测未知抗体)
1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml， 每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。
2、加样：加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做X、阴性及阳性孔对照)
3、加酶标抗体：于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标X二抗体(抗抗体)0.05ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤,X后一遍用DDW洗涤。
4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以X对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
五、ELISA试剂盒X点：
我司共有14000余种ELISA试剂盒物种涵盖Human,Mouse,Rat等，畅销品种具备以下X点：
极高品质—高品质的抗体和试剂是ELISA试剂盒的基础
X特异—特异检测目标分子，结果X可重复
高度灵敏—可检测到pg/mLX别的目标
种类齐全—可覆盖人、大鼠、小鼠、棉鼠、猕猴、猪、马、犬和猫等多个种属
X化设计—可拆卸式96孔板(12X8)，为血清、血浆、尿样和细胞培养物样本检测进行X化
六、“大鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒”咨询和订购的方法
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